Polymerase chain reaction (PCR) አነስተኛ መጠን ያለው ዲኦክሲራይቦኑክሊክ አሲድ (ዲ ኤን ኤ) በባዮሎጂካል ማቴሪያል ውስጥ በትክክል የተወሰኑ ቁርጥራጮቹን ፈልጎ እንድታገኝ እና ብዙ እጥፍ እንድትጨምር የሚያስችል የሞለኪውላር ባዮሎጂ ዘዴ ነው። ከዚያም በጌል ኤሌክትሮፊዮራይዝስ በምስላዊ ተለይተው ይታወቃሉ. ምላሹ እ.ኤ.አ. በ1983 በኬ. ሙሊስ የተፈጠረ ሲሆን በቅርብ ዓመታት ውስጥ የተገኙ አስደናቂ ግኝቶች ዝርዝር ውስጥ ተካትቷል።
የ PCR ዘዴዎች ምንድን ናቸው
አጠቃላዩ ቴክኒክ በኑክሊክ አሲዶች በራስ የመድገም አቅም ላይ የተመሰረተ ሲሆን በዚህ ሁኔታ ውስጥ በቤተ ሙከራ ውስጥ ሰው ሰራሽ በሆነ መንገድ ይከናወናል. የዲኤንኤ መባዛት በየትኛውም የሞለኪውል ክልል ውስጥ ላይጀምር ይችላል, ነገር ግን የተወሰነ ኑክሊዮታይድ ቅደም ተከተል ባላቸው ክልሎች ብቻ - የመነሻ ቁርጥራጮች. የ polymerase chain reaction ለመጀመር, ፕሪመር (ወይም የዲ ኤን ኤ መመርመሪያዎች) ያስፈልጋሉ. እነዚህ የኑክሊዮታይድ ቅደም ተከተል ያላቸው የዲኤንኤ ሰንሰለት አጫጭር ቁርጥራጮች ናቸው። ከናሙና ዲኤንኤው መነሻ ክልሎች ጋር ተጓዳኝ (ማለትም፣ ተዛማጅ) ናቸው።
በእርግጥ ሳይንቲስቶች ፕሪመርን ለመፍጠር በቴክኒኩ ውስጥ የተሳተፈውን ኑክሊክ አሲድ የኑክሊዮታይድ ቅደም ተከተል ማጥናት አለባቸው። የምላሹን ልዩነት እና አጀማመሩን የሚያቀርቡት እነዚህ የዲኤንኤ ምርመራዎች ናቸው። በናሙናው ውስጥ ቢያንስ አንድ የተፈለገው ዲ ኤን ኤ ሞለኪውል ካልተገኘ የ polymerase chain reaction አይሄድም። በአጠቃላይ ከላይ የተጠቀሱትን ፕሪመርሮች, የኑክሊዮታይድ ስብስብ, ሙቀትን የሚቋቋም የዲ ኤን ኤ ፖሊሜሬዜሽን ምላሽ እንዲሰጥ አስፈላጊ ነው. የኋለኛው ኢንዛይም ነው - በናሙናው ላይ የተመሰረቱ አዳዲስ የኒውክሊክ አሲድ ሞለኪውሎች ውህደት። እነዚህ ሁሉ ንጥረ ነገሮች ዲ ኤን ኤ ለመለየት አስፈላጊ የሆነውን ባዮሎጂያዊ ቁሳቁስ ጨምሮ ወደ ምላሽ ድብልቅ (መፍትሄ) ይጣመራሉ. ለተወሰነ ጊዜ በጣም ፈጣን ማሞቂያ እና ማቀዝቀዣን በሚያከናውን ልዩ ቴርሞስታት ውስጥ ተቀምጧል - ዑደት. ብዙውን ጊዜ ከ30-50 ነው።
ይህ ምላሽ እንዴት ነው የሚሰራው
ዋናው ቁምነገር በአንድ ዑደት ወቅት ፕሪመርሮች ከተፈለጉት የዲ ኤን ኤ ክፍሎች ጋር ተያይዘው ከቆዩ በኋላ ኢንዛይሙ በሚሰራበት ጊዜ በእጥፍ ይጨምራል። በተፈጠረው የዲኤንኤ ክሮች መሰረት፣ አዲስ እና አዲስ ተመሳሳይ የሞለኪውል ቁርጥራጮች በሚቀጥሉት ዑደቶች ውስጥ ይዋሃዳሉ።
የ polymerase chain reaction በቅደም ተከተል ይቀጥላል፣ የሚከተሉት ደረጃዎች ተለይተዋል። የመጀመሪያው በእያንዳንዱ ማሞቂያ እና ማቀዝቀዣ ዑደት ውስጥ የምርት መጠን በእጥፍ ይጨምራል. በሁለተኛው ደረጃ, ምላሹ ይቀንሳል, ኢንዛይም ተጎድቷል እንዲሁም እንቅስቃሴን ያጣል. በተጨማሪም የኑክሊዮታይድ እና የፕሪመርስ ክምችቶች ተሟጠዋል. በመጨረሻው ደረጃ - አምባ - ምርቶች ከአሁን በኋላ አይከማቹም,ምክንያቱም ዳግም ወኪሎቹ ስለወጡ።
የሚገለገልበት
ያለ ጥርጥር፣ የ polymerase chain reaction በህክምና እና በሳይንስ ውስጥ በጣም ሰፊውን መተግበሪያ ያገኛል። በአጠቃላይ እና በግል ባዮሎጂ, የእንስሳት ህክምና, ፋርማሲ እና አልፎ ተርፎም ስነ-ምህዳር ጥቅም ላይ ይውላል. ከዚህም በላይ በኋለኛው ውስጥ የምግብ ምርቶችን እና የአካባቢ ቁሳቁሶችን ጥራት ለመከታተል ይህን ያደርጋሉ. የፖሊሜራዝ ሰንሰለት ምላሽ አባትነትን ለማረጋገጥ እና ሰውን ለመለየት በፎረንሲክ ልምምድ ውስጥ በንቃት ጥቅም ላይ ይውላል። በፎረንሲክስ እንዲሁም በፓሊዮንቶሎጂ ውስጥ ይህ ዘዴ ብዙውን ጊዜ ብቸኛው መውጫ መንገድ ነው ፣ ምክንያቱም ብዙውን ጊዜ ዲ ኤን ኤ ለምርምር ሊገኝ አይችልም። እርግጥ ነው, ዘዴው በተግባራዊ ሕክምና ውስጥ በጣም ሰፊ የሆነ መተግበሪያ አግኝቷል. እንደ ጄኔቲክስ፣ ተላላፊ በሽታዎች እና ኦንኮሎጂካል በሽታዎች ባሉ አካባቢዎች ያስፈልጋል።
