በማይክሮባዮሎጂ ውስጥ በአጉሊ መነጽር ምርምር ዘዴዎች

ዝርዝር ሁኔታ:

በማይክሮባዮሎጂ ውስጥ በአጉሊ መነጽር ምርምር ዘዴዎች
በማይክሮባዮሎጂ ውስጥ በአጉሊ መነጽር ምርምር ዘዴዎች
Anonim

አጉሊ መነጽር የምርምር ዘዴዎች ልዩ መሳሪያዎችን በመጠቀም የተለያዩ ነገሮችን የማጥናት ዘዴዎች ናቸው። የቁሳቁሶች እና ፍጥረታት አወቃቀሮችን እንድናስብ ያስችለናል, የእነሱ መጠን ከሰው ዓይን መፍትሄ በላይ ነው. በጽሁፉ ውስጥ፣ በአጉሊ መነጽር የሚታዩ የምርምር ዘዴዎችን በአጭሩ እንመረምራለን።

በአጉሊ መነጽር ምርምር ዘዴዎች
በአጉሊ መነጽር ምርምር ዘዴዎች

አጠቃላይ መረጃ

ዘመናዊ የአጉሊ መነጽር ምርመራ ዘዴዎች በተለያዩ ስፔሻሊስቶች በተግባራቸው ጥቅም ላይ ይውላሉ። ከነሱ መካከል ቫይሮሎጂስቶች, ሳይቲሎጂስቶች, የደም ህክምና ባለሙያዎች, ሞርሞሎጂስቶች እና ሌሎችም ይገኙበታል. የአጉሊ መነጽር ምርመራ ዋና ዘዴዎች ለረጅም ጊዜ ይታወቃሉ. በመጀመሪያ ደረጃ, ይህ ነገሮችን የመመልከት የብርሃን ዘዴ ነው. ከቅርብ ዓመታት ወዲህ, ሌሎች ቴክኖሎጂዎች በተግባር ላይ በንቃት ገብተዋል. ስለዚህ, ደረጃ-ንፅፅር, luminescent, ጣልቃ ገብነት, ፖላራይዜሽን, ኢንፍራሬድ, አልትራቫዮሌት, stereoscopic የምርምር ዘዴዎች ተወዳጅነት አግኝተዋል. ሁሉም በተለያዩ ንብረቶች ላይ የተመሰረቱ ናቸው.ስቬታ በተጨማሪም የኤሌክትሮኒክስ ጥቃቅን የምርምር ዘዴዎች በሰፊው ጥቅም ላይ ይውላሉ. እነዚህ ዘዴዎች በቀጥታ የተሞሉ ቅንጣቶችን በመጠቀም ነገሮችን እንዲያሳዩ ያስችሉዎታል. እንደነዚህ ያሉት የጥናት ዘዴዎች በባዮሎጂ እና በሕክምና ውስጥ ብቻ ጥቅም ላይ እንደሚውሉ ልብ ሊባል ይገባል. በኢንዱስትሪ ውስጥ ብረቶችን እና ውህዶችን የማጥናት በአጉሊ መነጽር ዘዴ በጣም ተወዳጅ ነው. እንዲህ ዓይነቱ ጥናት የመገጣጠሚያዎችን ባህሪ ለመገምገም, የመውደቅ እድልን ለመቀነስ እና ጥንካሬን ለመጨመር ቴክኖሎጂዎችን ማዳበር ያስችላል.

ቀላል መንገዶች፡ ባህሪያት

እንደዚህ ያሉ ጥቃቅን ተሕዋስያንን እና ሌሎች ነገሮችን ለማጥናት የሚረዱ ዘዴዎች በተለያዩ የመሳሪያዎች ጥራቶች ላይ የተመሰረቱ ናቸው. በዚህ ጉዳይ ላይ አስፈላጊ ነገሮች የጨረር አቅጣጫ, የእቃው ገፅታዎች ናቸው. የኋለኛው, በተለይም, ግልጽ ወይም ግልጽ ያልሆነ ሊሆን ይችላል. በእቃው ባህሪያት መሰረት የብርሃን ፍሰቱ አካላዊ ባህሪያት ይለዋወጣሉ - ብሩህነት እና ቀለም, በ amplitude እና የሞገድ ርዝመት, አውሮፕላን, ደረጃ እና ማዕበል ስርጭት አቅጣጫ ምክንያት. የተለያዩ ጥቃቅን የምርምር ዘዴዎች በእነዚህ ባህሪያት አጠቃቀም ላይ የተመሰረቱ ናቸው።

ልዩዎች

በብርሃን ዘዴዎች ለማጥናት ብዙውን ጊዜ ነገሮች ቀለም የተቀቡ ናቸው። ይህ የተወሰኑ ንብረቶቻቸውን ለይተው እንዲገልጹ ያስችልዎታል. ይህ ቀለም የተወሰኑ አወቃቀሮችን የሚገለጠው በተገደሉ ሴሎች ውስጥ ብቻ ስለሆነ ሕብረ ሕዋሳቱ እንዲስተካከሉ ይጠይቃል። በሕያዋን ሴሎች ውስጥ, ቀለም በሳይቶፕላዝም ውስጥ እንደ ቫኩዩል ተለይቷል. አወቃቀሮችን ቀለም አይቀባም. ነገር ግን በብርሃን ማይክሮስኮፕ እገዛ, ህይወት ያላቸው ነገሮችም ሊመረመሩ ይችላሉ.ለዚህም አስፈላጊ የሆነ የጥናት ዘዴ ጥቅም ላይ ይውላል. በእንደዚህ ዓይነት ሁኔታዎች ውስጥ, የጨለማ-ሜዳ ኮንዲነር ጥቅም ላይ ይውላል. በብርሃን ማይክሮስኮፕ ውስጥ ነው የተሰራው።

ጥቃቅን የምርምር ዘዴዎች ትንተና
ጥቃቅን የምርምር ዘዴዎች ትንተና

ያልተቀቡ ነገሮችን በማጥናት

ከደረጃ-ንፅፅር ማይክሮስኮፒ በመጠቀም ይከናወናል። ይህ ዘዴ በእቃው ገፅታዎች መሰረት በጨረራው ልዩነት ላይ የተመሰረተ ነው. በተጋላጭነት ሂደት ውስጥ በደረጃ እና በሞገድ ርዝመት ላይ ለውጥ ይታያል. በአጉሊ መነጽር ዓላማ ውስጥ ግልጽ የሆነ ጠፍጣፋ አለ. ሕያው ወይም ቋሚ, ነገር ግን ቀለም ያልሆኑ ነገሮች, ግልጽነታቸው ምክንያት, ማለት ይቻላል ቀለም እና በሞገድ ደረጃ ላይ ብቻ ፈረቃ የሚቀሰቅስ, በእነርሱ ውስጥ ማለፍ ያለውን ጨረር ቀለም እና amplitude መቀየር አይደለም. ግን በተመሳሳይ ጊዜ በእቃው ውስጥ ካለፉ በኋላ የብርሃን ፍሰቱ ከጣፋዩ ይለያል. በውጤቱም, በእቃው ውስጥ በሚያልፉ ጨረሮች መካከል እና ወደ ብርሃን ዳራ ውስጥ ሲገቡ, የሞገድ ርዝመት ልዩነት ይታያል. በተወሰነ እሴት ላይ የእይታ ውጤት ይከሰታል - ጥቁር ነገር በብርሃን ዳራ ላይ በግልጽ ይታያል ፣ ወይም በተቃራኒው (በደረጃ ሰሌዳው ባህሪዎች መሠረት)። እሱን ለማግኘት፣ ልዩነቱ ቢያንስ 1/4 የሞገድ ርዝመት መሆን አለበት።

አኖፕትራል ዘዴ

የደረጃ-ንፅፅር ዘዴ አይነት ነው። የአኖፕታል ዘዴው የበስተጀርባ ብርሃንን ቀለም እና ብሩህነት ብቻ የሚቀይሩ ልዩ ሳህኖች ያሉት ሌንስን መጠቀምን ያካትታል. ይህ ቀለም ያልተቀቡ ህይወት ያላቸውን ነገሮች የማጥናት እድሎችን በእጅጉ ያሰፋዋል. የደረጃ-ንፅፅር ጥቃቅን የጥናት ዘዴ በማይክሮባዮሎጂ ፣ በዕፅዋት እና በእንስሳት ሴሎች ጥናት ውስጥ ፓራሲቶሎጂ ፣በጣም ቀላሉ ፍጥረታት. በሂማቶሎጂ ይህ ዘዴ የደም እና የአጥንት መቅኒ ንጥረ ነገሮችን ልዩነት ለማስላት እና ለመወሰን ይጠቅማል።

የጣልቃ ቴክኒኮች

እነዚህ በአጉሊ መነጽር ብቻ የሚታዩ የምርምር ዘዴዎች ከክፍል-ንፅፅር ጋር ተመሳሳይ ችግሮችን ይፈታሉ። ነገር ግን, በኋለኛው ሁኔታ, ስፔሻሊስቶች የነገሮችን ቅርጽ ብቻ መመልከት ይችላሉ. ጣልቃ-ገብነት ጥቃቅን የምርምር ዘዴዎች ክፍሎቻቸውን እንዲያጠኑ ያስችሉዎታል, የንጥረ ነገሮችን የቁጥር ግምገማ ለማካሄድ. ይህ ሊሆን የቻለው የብርሃን ጨረር በሁለትዮሽነት ምክንያት ነው. አንዱ ፍሰት በእቃው ክፍል ውስጥ ያልፋል, ሌላኛው ደግሞ ያልፋል. በአጉሊ መነጽር ዓይን ውስጥ, ተሰብስበው ጣልቃ ይገባሉ. የተፈጠረው የደረጃ ልዩነት በተለያዩ ሴሉላር አወቃቀሮች ብዛት ሊወሰን ይችላል። በተከታታይ በተሰጡት የማጣቀሻ ኢንዴክሶች በመለካት ያልተስተካከሉ ሕብረ ሕዋሳት እና ህይወት ያላቸው ነገሮች ውፍረት, በውስጣቸው ያለው የፕሮቲን ይዘት, ደረቅ ቁስ እና ውሃ, ወዘተ. በተገኘው መረጃ መሰረት ስፔሻሊስቶች ናቸው. በተዘዋዋሪ የሜምብ ፐርሜሊቲነትን፣ የኢንዛይም እንቅስቃሴን እና ሴሉላር ሜታቦሊዝምን መገምገም ይችላል።

በአጉሊ መነጽር ምርመራ መሰረታዊ ዘዴዎች
በአጉሊ መነጽር ምርመራ መሰረታዊ ዘዴዎች

ፖላራይዜሽን

የተካሄደው ኒኮል ፕሪዝም ወይም የፊልም ፖላሮይድ በመጠቀም ነው። በመድሃኒት እና በብርሃን ምንጭ መካከል ይቀመጣሉ. በማይክሮባዮሎጂ ውስጥ ያለው የፖላራይዜሽን በአጉሊ መነጽር ምርምር ዘዴ ተመሳሳይነት የሌላቸው ንብረቶች ያላቸውን ነገሮች ለማጥናት ያስችላል። በ isotropic መዋቅሮች ውስጥ, የብርሃን ስርጭት ፍጥነት በተመረጠው አውሮፕላን ላይ የተመካ አይደለም. በዚህ ሁኔታ, በ anisotropic ስርዓቶች ውስጥ, ፍጥነት በሚከተለው መሰረት ይለወጣልበእቃው ተሻጋሪ ወይም ቁመታዊ ዘንግ ላይ ያለው የብርሃን ቀጥተኛነት። በመዋቅሩ ላይ ያለው የንፅፅር መጠን ከተሻጋሪው ጋር ካለው የበለጠ ከሆነ ድርብ አዎንታዊ ነጸብራቅ ይፈጠራል። ይህ ጥብቅ የሞለኪውላዊ ዝንባሌ ያላቸው የብዙ ባዮሎጂካል ነገሮች ባህሪ ነው። ሁሉም አኒሶትሮፒክ ናቸው. ይህ ምድብ በተለይ myofibrils, neurofibrils, cilia in the ciliated epithelium, collagen fibers እና ሌሎችንም ያጠቃልላል።

የፖላራይዜሽን ዋጋ

የጨረር ነጸብራቅ ተፈጥሮ እና የነገሩን አኒሶትሮፒ ኢንዴክስ ማነፃፀር የአወቃቀሩን ሞለኪውላዊ አደረጃጀት ለመገምገም ያስችላል። የፖላራይዜሽን ዘዴ እንደ ሂስቶሎጂካል ትንተና ዘዴዎች አንዱ ነው, በሳይቶሎጂ ውስጥ ጥቅም ላይ ይውላል, ወዘተ … በብርሃን ውስጥ ቀለም ያላቸው ነገሮች ብቻ ሳይሆኑ ሊጠኑ ይችላሉ. የፖላራይዜሽን ዘዴው ያልቆሸሸ እና ያልተስተካከሉ - ቤተኛ - የቲሹ ክፍሎች ዝግጅቶችን ለማጥናት ያስችላል።

ቁሳቁሶች የምርምር ዘዴዎች በአጉሊ መነጽር
ቁሳቁሶች የምርምር ዘዴዎች በአጉሊ መነጽር

የLuminescent ዘዴዎች

በሰማያዊ-ቫዮሌት የስፔክትረም ክፍል ወይም በUV ጨረሮች ላይ ብርሃን ለመስጠት በአንዳንድ ነገሮች ባህሪያት ላይ የተመሰረቱ ናቸው። እንደ ፕሮቲኖች ፣ አንዳንድ ቪታሚኖች ፣ ኮኢንዛይሞች ፣ መድኃኒቶች ያሉ ብዙ ንጥረ ነገሮች የመጀመሪያ ደረጃ (ውስጣዊ) luminescence ተሰጥቷቸዋል። ፍሎሮክሮምስ, ልዩ ማቅለሚያዎች ሲጨመሩ ሌሎች ነገሮች ማብራት ይጀምራሉ. እነዚህ ተጨማሪዎች እየመረጡ ወይም በተበታተነ ሁኔታ ወደ ግለሰባዊ ሴሉላር አወቃቀሮች ወይም ኬሚካላዊ ውህዶች ተሰራጭተዋል። ይህ ንብረት histochemical እና luminescence microscopy አጠቃቀም መሠረት ሠራየሳይቶሎጂ ጥናቶች።

መጠቀሚያ ቦታዎች

immuno-fluorescenceን በመጠቀም ኤክስፐርቶች ቫይራል አንቲጂኖችን ይለያሉ እና ትኩረታቸውን ይወስናሉ ፣ቫይረሶችን ፣ ፀረ እንግዳ አካላትን እና አንቲጂኖችን ፣ ሆርሞኖችን ፣ የተለያዩ የሜታቦሊክ ምርቶችን እና የመሳሰሉትን ይለያሉ። በዚህ ረገድ የሄርፒስ ፣ የሳንባ ነቀርሳ ፣ የቫይረስ ሄፓታይተስ ፣ ኢንፍሉዌንዛ እና ሌሎች ኢንፌክሽኖች በሚመረመሩበት ጊዜ ቁሳቁሶችን ለመመርመር የብርሃን ዘዴዎች ጥቅም ላይ ይውላሉ ። በአጉሊ መነጽር የሚታየው የበሽታ መከላከያ ዘዴ አደገኛ ዕጢዎችን ለይቶ ለማወቅ፣ በልብ ሕመም የመጀመሪያ ደረጃ ላይ ያሉ ischemic አካባቢዎችን ለመወሰን፣ ወዘተ

ብረቶች እና ውህዶች ለማጥናት በአጉሊ መነጽር ዘዴ
ብረቶች እና ውህዶች ለማጥናት በአጉሊ መነጽር ዘዴ

አልትራቫዮሌት ብርሃንን በመጠቀም

በህያዋን ህዋሶች፣ ረቂቅ ህዋሳት ወይም ቋሚ፣ ግን ቀለም የሌላቸው፣ የሚታዩ-ብርሃን-ግልጽ ቲሹዎች ውስጥ የተካተቱት በርካታ ንጥረ ነገሮች የተወሰነ የሞገድ ርዝመት ያለው UV ጨረሮችን ለመምጠጥ ባለው ችሎታ ላይ የተመሰረተ ነው። ይህ በተለይ ለ macromolecular ውህዶች የተለመደ ነው. እነዚህም ፕሮቲኖች, መዓዛ ያላቸው አሲዶች (ሜቲላላኒን, ትራይፕቶፋን, ታይሮሲን, ወዘተ), ኑክሊክ አሲዶች, ፒራሚዳል እና ፕዩሪን መሠረቶች, ወዘተ. አልትራቫዮሌት ማይክሮስኮፕ የእነዚህን ውህዶች አካባቢያዊነት እና መጠን ግልጽ ለማድረግ ያስችላል። ህይወት ያላቸውን ነገሮች በሚያጠኑበት ጊዜ ስፔሻሊስቶች በህይወት ሂደታቸው ላይ ለውጦችን ማየት ይችላሉ።

ዘመናዊ የአጉሊ መነጽር ምርመራ ዘዴዎች
ዘመናዊ የአጉሊ መነጽር ምርመራ ዘዴዎች

ተጨማሪ

የኢንፍራሬድ ማይክሮስኮፒ ለብርሃን እና ለአልትራቫዮሌት ጨረሮች ግልጽ ያልሆኑ ነገሮችን በመምጠጥ ለማጥናት ይጠቅማል።የፍሰት አወቃቀሮች, የሞገድ ርዝመቱ 750-1200 nm ነው. ይህንን ዘዴ ለመተግበር ቅድመ ዝግጅቶችን ለኬሚካል ሕክምና ማጋለጥ አያስፈልግም. እንደ አንድ ደንብ የኢንፍራሬድ ዘዴ በአንትሮፖሎጂ, በእንስሳት እና በሌሎች ባዮሎጂካል መስኮች ውስጥ ጥቅም ላይ ይውላል. እንደ መድሃኒት, ይህ ዘዴ በዋነኝነት በ ophthalmology እና neuromorphology ውስጥ ጥቅም ላይ ይውላል. የቮልሜትሪክ እቃዎች ጥናት የሚከናወነው ስቴሪዮስኮፒክ ማይክሮስኮፕ በመጠቀም ነው. የመሳሪያው ንድፍ በተለያዩ አቅጣጫዎች በግራ እና በቀኝ ዓይኖች ምልከታ እንዲያደርጉ ያስችልዎታል. ግልጽ ያልሆኑ ነገሮች በአንጻራዊ ሁኔታ ዝቅተኛ ማጉላት (ከ 120 ጊዜ ያልበለጠ) ይመረመራሉ. ስቴሪዮስኮፒክ ዘዴዎች በማይክሮሰርጀሪ፣ በፓቶሞርፎሎጂ እና በፎረንሲክ መድኃኒቶች ጥቅም ላይ ይውላሉ።

የኤሌክትሮን ማይክሮስኮፒ

በማክሮ ሞለኪውላር እና ንዑስ ሴሉላር ደረጃ ላይ ያሉትን የሴሎች እና የቲሹዎች አወቃቀር ለማጥናት ይጠቅማል። ኤሌክትሮን ማይክሮስኮፕ በምርምር መስክ ጥራት ያለው ዝላይ ለማድረግ አስችሏል. ይህ ዘዴ በባዮኬሚስትሪ, ኦንኮሎጂ, ቫይሮሎጂ, ሞርፎሎጂ, ኢሚውኖሎጂ, ጄኔቲክስ እና ሌሎች ኢንዱስትሪዎች በስፋት ጥቅም ላይ ይውላል. በኤሌክትሮማግኔቲክ መስኮች ውስጥ በቫኩም ውስጥ በሚያልፉ የኤሌክትሮኖች ፍሰት ውስጥ የመሳሪያው ጥራት ከፍተኛ ጭማሪ ይሰጣል። የኋለኞቹ, በተራው, በልዩ ሌንሶች የተፈጠሩ ናቸው. ኤሌክትሮኖች በአንድ ነገር አወቃቀሮች ውስጥ የማለፍ ችሎታ አላቸው ወይም ከነሱ በተለያዩ ማዕዘኖች ላይ ልዩነቶችን ያንፀባርቃሉ። በውጤቱም, በመሳሪያው የብርሃን ጨረር ማያ ገጽ ላይ ማሳያ ይፈጠራል. በማስተላለፊያ ማይክሮስኮፒ፣ የዕቅድ ምስል ተገኝቷል፣ በመቃኘት፣ በቅደም ተከተል፣ ጥራዝ።

ኤሌክትሮን በአጉሊ መነጽር ምርምር ዘዴዎች
ኤሌክትሮን በአጉሊ መነጽር ምርምር ዘዴዎች

አስፈላጊ ሁኔታዎች

በኤሌክትሮን በአጉሊ መነጽር ምርመራ ከመደረጉ በፊት ዕቃው ልዩ ዝግጅት እንደሚያደርግ ልብ ሊባል ይገባል። በተለይም የሕብረ ሕዋሳት እና ፍጥረታት አካላዊ ወይም ኬሚካላዊ ማስተካከያ ጥቅም ላይ ይውላል. የሴክሽን እና ባዮፕሲ ቁሳቁስ ፣ በተጨማሪ ፣ ደርቋል ፣ በ epoxy resins ውስጥ ፣ በአልማዝ ወይም በመስታወት ቢላዎች ወደ አልትራቲን ክፍሎች የተቆረጠ ነው። ከዚያም ተቃርኖ እና ጥናት ይደረጋል. በአጉሊ መነጽር, የነገሮች ንጣፎች ይመረመራሉ. ይህንን ለማድረግ በልዩ እቃዎች በቫኩም ክፍል ውስጥ ይረጫሉ.

የሚመከር: