የVoges-Proskauer ምላሽ ለኢንትሮባክቴሪያ የማይክሮባዮሎጂ ልዩነት መተግበሪያ።

2024 ደራሲ ደራሲ: Angel Austin | [email protected]. ለመጨረሻ ጊዜ የተሻሻለው: 2023-12-17 05:15

የኢንትሮባክቴሪያን እና የአንዳንድ ንዝረትን ልዩነት በሚወስኑበት ጊዜ የ Voges-Proskauer ምላሽ ልዩ ቦታን ይይዛል። ምርመራው ባክቴሪያ ግሉኮስን በማፍላት አሴቶይንን ለመፍጠር ባለው አቅም ላይ የተመሰረተ ነው።

የምርምር ሂደቱ ምንነት

በማይክሮባዮሎጂ፣ Voges-Proskauer ምላሽ ብዙውን ጊዜ በየርሲኒያ የኢንትሮባክቴሪያ ቤተሰብ ውስጥ (የ pseudotuberculosis እና የኢንቴሮኮሌት በሽታ አምጪ ተህዋስያንን ጨምሮ) ፣ Escherichia ኮላይ እና ስፖሮ-አውሮቦችን ለመለየት ይጠቅማል። ውጤቱም የተወሰኑ ሬጀንቶች ሲጨመሩ መካከለኛውን ቀለም በመቀባት ይታያል።

ይህ ሙከራ የIMViC ተከታታይ ነው (የኢንዶል ምህጻረ ቃል፣ሜቲል ቀይ፣ Voges-Proskauer i Citrate) - ልዩ ፍቺዎችን ጨምሮ የመለያ ሙከራዎች ቡድን፡

• ከኢንዶል ጋር፣ በትሪፕቶፋን ኢንዶሌ መከፋፈል ላይ በመመስረት፣ Kovacs ወይም Ehrlich reagent ሲኖር ጥቅም ላይ ይውላል፤
• በመጠቀም ላይሜቲልሮት ወይም ሜቲል ቀይ፣ በግሉኮስ ሜታቦላይዜሽን ምክንያት የተሰጠውን ፒኤች የሚለይ፤
• Voges-Proskauer ምላሾች አሴቲል-ሜቲልካርቢኖል እንዲገኝ፤
• የሲትሬት አጠቃቀምን ከቀለም ለውጥ ጋር በመሃከለኛዎቹ አልካላይዜሽን ምክንያት።

የሂደቱ ፍሬ ነገር በምርመራ የተመረመሩ ባክቴሪያዎች መኖራቸውን የሚያሳዩት አሴቶይን ኦክሲጅን በሚኖርበት ጊዜ ከካስቲክ ፖታሽ ጋር በመገናኘት ነው። አሴቲል-ሜቲልካርቢኖል ወደ ዳይኬቲል ኦክሳይድ ይደረግበታል, እሱም ደማቅ ቀይ ወይም ሮዝ ውህድ ይፈጥራል. ካስቲክ ፖታሽ ከመጨመራቸው በፊት አልፋ-ናፍታሆልን በማስተዋወቅ የፈተናውን ስሜት ያሳድጉ።

የሙከራ ቅንብር

የ Voges-Proskauer ምላሽ አጻጻፍ ረቂቅ ተሕዋስያንን ቀድመው ማልማትን ያካትታል። ንጹህ ባህል በክላርክ ልዩነት መመርመሪያ ሚዲያ ላይ ይዘራል፣ ልዩነቱ የክላርክ መረቅ (አጋር-ጋር ሳይጨመር) ነው። ዝግጁ የሆነ መካከለኛ ጥቅም ላይ ይውላል ወይም ለብቻው ይዘጋጃል። ግብዓቶች የሚከተሉትን ያካትታሉ፡

• 5g pepton;
• 5g ግሉኮስ፤
• 5g ዲባሲክ ፖታሲየም ፎስፌት፤
• 1L distillate።

በጥናቱ ወቅት ባህሉ በማይጸዳ ባክቴሪያሎጂካል ሉፕ ወደ ፈሳሽ መሃከል እንዲገባ ተደርጓል። ብዛት - በሙከራ ቱቦ ውስጥ 5 ml እና ቁጥጥር. ለሁለት ቀናት በ 35-37 ዲግሪ በሚገኝ የሙቀት መጠን መፈልሰፍ ይካሄዳል. በመቀጠል የ Voges-Proskauer ምላሽ ጥናት በደረጃ ይከናወናል፡

1. 2፣ 5 ሚሊር የሾርባ ባህል ወደ ጸዳ ቱቦ ይተላለፋል።
2. ስድስት ጠብታዎች የአልፋ-ናፕቶል (5% የአልኮል መፍትሄ) ይጨምሩ።
3. አክል 40%የካስቲክ ፖታስየም መፍትሄ በ0.1 ሚሊር ወይም ሁለት ጠብታዎች።
4. ማነቃነቅ የሚካሄደው የሙከራ ቱቦውን በቀስታ በመነቅነቅ ነው።
5. ሙከራው ከተጀመረ ከ15 ደቂቃዎች በኋላ ውጤቱን ይገምግሙ።

አማራጭ የፍተሻ ዘዴ በአንድ ጀንበር የመታቀፉ ጊዜ ሲሆን ይህም ጊዜ ወደ 18 ሰአታት ወይም እስከ አንድ ቀን ይቀንሳል። ከዚህ ዘዴ በተጨማሪ ኤክስፕረስ ሙከራም ጥቅም ላይ ይውላል-ባህል በ 2 ሚሊ ሜትር መካከለኛ መጠን ውስጥ በ loop ውስጥ ይተዋወቃል, ለአራት ሰአታት ያህል ይጠመዳል, ከዚያም reagents በእኩል መጠን 2-3 ጠብታዎች ውስጥ ይጨምራሉ, ቅልቅል እና ውጤቱ ከአስር ደቂቃዎች በኋላ ይገመገማል።

መቆጣጠሪያው የሳንባ ምች መንስኤ ከሆኑት መካከል አንዱ ነው Klebsiella pneumoniae - strain atcc 13883.

የውጤቱ ግምገማ

ሪኤጀንቶችን ከጨመሩ በኋላ ከሚፈለገው ጊዜ በኋላ (ከ 5 እስከ 15 ደቂቃዎች) ፣ የቼሪ-ቀይ ቀለም በአዎንታዊ ምላሽ ፣ ቀይ እና ሮዝ - በደካማ አዎንታዊ ምላሽ መታየት አለበት። ምንም ለውጥ እንደ አሉታዊ ውጤት አልተመዘገበም።

በመፍትሔው ውስጥ ያለው የካስቲክ ፖታሽ ከመጠን በላይ መጠጣት አወንታዊ ምላሽን በማስመሰል በመዳብ ቀለም መቀባት ይችላል። በዚህ ሁኔታ, የተሞከረው ቅኝ ግዛት አሉታዊ ምላሽ መመዝገብ አለበት. እንዲሁም፣ የመዳብ ቀለም ምዘናው ከተሰጠ ከአንድ ሰአት በኋላ ሪጀንተሮች ከገቡ በኋላ ይታያል።

ውጤቱን በሚገመግምበት ወቅት የተጠኑ ረቂቅ ተህዋሲያን (ከሶስት ቀናት በላይ) ለረጅም ጊዜ ማልማት መካከለኛውን አሲዳማነት እንደሚያመጣ እና ይህም የጥናቱ ትክክለኛ ያልሆነ ውጤት እንደሚያስገኝ ግምት ውስጥ ማስገባት ያስፈልጋል. ምላሹ በትንሹ አዎንታዊ ወይም ሊሆን ይችላል።የውሸት አሉታዊ።

የሙከራ ምላሽ ሰጪዎች መስፈርቶች

Voges-Proskauer reagents በተገቢው ማከማቻ የሚገኝ ትክክለኛ ትኩረት፣ ከፍተኛ ንፅህና እና መረጋጋት ያሉ መስፈርቶችን ማሟላት አለባቸው።

ለመጠቀም ዝግጁ የሆኑ የሙከራ ኪቶች ለ100 ወይም ከዚያ በላይ ጥቅም ላይ የሚውሉ ሪጀንቶችን ይይዛሉ እና በፕላስቲክ ወይም ባለቀለም የመስታወት ጠርሙሶች ውስጥ ይመጣሉ። ጥራት በሚመለከታቸው ሰነዶች ቁጥጥር ይደረግበታል።